Diagnosticul molecular corespunde unui set de tehnici moleculare care au ca scop identificarea modificărilor ADN-ului care ar putea fi indicatoare ale bolilor genetice sau ale cancerului, de exemplu. În plus, tehnicile moleculare sunt utilizate pe scară largă pentru identificarea și confirmarea bolilor infecțioase, deoarece reprezintă o metodă de diagnostic mai rapidă și mai precisă.
Diagnosticul molecular este costisitor și, prin urmare, nu este solicitat foarte des de medici, cu toate acestea, dă rezultate precise în ceea ce privește prezența schimbării, modul în care poate interfera cu funcționarea organismului și răspunsul pacientului la tratament.
Pentru ce este
Diagnosticul molecular poate fi realizat cu mai multe obiective, principalele fiind:
- Identificarea mutațiilor legate de leucemie, cum ar fi identificarea translocării BCR-ABL, care este caracteristică pentru leucemia mieloidă cronică (LMM); Modificări moleculare care indică apariția cancerului, cum ar fi cancerul colorectal, pulmonar, sân și creier, de exemplu; Diagnosticul bolilor infecțioase, cum ar fi hepatita, uretrita, toxoplasmoza, leishmanioza etc., pe lângă identificarea virusului HPV.
Diagnosticul molecular, deși este considerat scump în comparație cu alte tehnici de diagnostic, este mai precis, deoarece este capabil să informeze schimbarea legată de o anumită boală și gradul de influență al acestei modificări în organism, ajutând astfel tratamentul persoanei.
Pe lângă faptul că sunt utilizate pentru diagnosticul diferitelor boli, tehnicile moleculare sunt de asemenea folosite pentru a evalua răspunsul la tratament, în special la persoanele cu cancer, fiind una dintre cele mai eficiente metode de a indica evoluția și recidiva bolii.
Cum se face
Diagnosticul molecular poate fi efectuat cu orice probă, fiind solicitat de medic cel care poate oferi cel mai bine informații despre starea pacientului, care poate fi urină, salivă sau, în cele mai multe cazuri, sânge. Nu este nevoie de post sau de orice altă pregătire pentru examen.
Eșantionul este colectat și trimis în laborator împreună cu îndrumarea medicului care informează examenul sau tipul de cercetare care ar trebui efectuat. Tehnica moleculară efectuată depinde de examenul solicitat și implică o serie de proceduri precise care urmăresc identificarea prezenței sau absenței modificării solicitate de medic.
De obicei se folosește doar o cantitate mică de eșantion trimis, restul fiind păstrat astfel încât, dacă este necesar, examenul să fie repetat.
Vezi care sunt principalele tehnici moleculare
PCR
PCR, scurt pentru reacția în lanț a polimerazei sau reacția în lanț a polimerazei , este o tehnică moleculară care constă în amplificarea unui fragment de material genetic, fie ADN, fie ARN, cu obiectivul de a identifica mutațiile și, astfel, de a ajuta la diagnosticul bolilor.
Această tehnică este făcută din extracția și purificarea materialului genetic, care este apoi plasat într-un amestec în care una dintre componente este o enzimă de restricție care variază în funcție de testul solicitat și a cărui funcție este de a tăia materialul în fragmente. pentru a putea fi identificată posibila modificare genetică. Amestecul este plasat într-un termocicler, care este un dispozitiv care acționează prin variația de temperatură indicată de profesionist în conformitate cu examenul și, astfel, permite amplificarea fragmentului genetic. În cazul PCR convențional, după amplificare, produsul PCR este supus electroforezei, care este o tehnică moleculară bazată pe greutatea și dimensiunea fragmentelor, adică, în funcție de aceste caracteristici, este generat un model de bandă, a cărui analiză se face bazat pe banda de control pozitiv, adică banda cunoscută că corespunde alterației genetice.
PCR în timp real, numit și qPCR, este un tip de PCR cantitativ, adică pe lângă identificarea alterării genetice, este capabil să ofere informații despre expresia genelor, adică cât de mult se exprimă gena modificată în organism., astfel, poate fi utilizat pentru a ajuta diagnosticul și monitorizarea tratamentului. PCR în timp real nu necesită electroforeză, întregul proces de amplificare și analiză a materialului genetic este realizat de un dispozitiv, iar rezultatul este interpretat de un profesionist în domeniul sănătății.
secvențiere
Secvențializarea este o tehnică moleculară care constă în determinarea secvenței nucleotidelor ADN, care sunt unitățile formatoare ale materialului genetic. Secvențializarea are loc dintr-o reacție similară cu PCR, cu toate acestea, în amestecul de amplificare, se adaugă nucleotide modificate prin adăugarea de fluorocromuri, care pe măsură ce materialul este amplificat, nucleotidele modificate sunt încorporate în ADN și generează mai multe fragmente, care corespund produsului de secvențiere.
Produsul de reacție este plasat într-un dispozitiv numit secvențitor ADN, în care, pe măsură ce fragmentele sunt atinse de laserul echipamentului, fluorocromele sunt excitate, emitând fluorescență, care este indicat de echipament cu ajutorul vârfurilor, cu fiecare vârf corespunzător la un nucleotid. La sfârșitul reacției, echipamentul va informa secvența ADN, putând astfel ajuta medicul în diagnosticul bolilor genetice.
