- Pentru ce este
- Cum se face
- Tipuri de electroforeză
- 1. Electroforeza hemoglobinei
- 2. Electroforeza proteinelor
Electroforeza este o tehnică de laborator realizată cu obiectivul de a separa moleculele în funcție de dimensiunea și încărcarea electrică a acestora, astfel încât diagnosticul bolilor să poată fi făcut, să poată fi verificată expresia proteinelor sau să poată fi identificate microorganisme.
Electroforeza este o procedură simplă și cu costuri reduse, fiind utilizată în rutina de laborator și în proiecte de cercetare. În conformitate cu scopul electroforezei, poate fi necesar să se efectueze alte teste și examene pentru a ajunge la un diagnostic, de exemplu.
Pentru ce este
Electroforeza poate fi realizată în scopuri diferite, atât în proiecte de cercetare, cât și în diagnostic, deoarece este o tehnică simplă și cu costuri reduse. Astfel, electroforeza poate fi efectuată pentru:
- Identificați viruși, ciuperci, bacterii și paraziți, cea mai frecventă fiind această aplicație în proiectele de cercetare; Test de paternitate; Verificați expresia proteinelor; Identificați mutațiile, fiind utile în diagnosticul de leucemie, de exemplu; Analizați tipurile de hemoglobină circulantă, fiind util în diagnosticul anemiei celulelor secera; evaluați cantitatea de proteine prezente în sânge.
În conformitate cu scopul electroforezei, poate fi necesar să se efectueze alte teste complementare pentru ca medicul să completeze diagnosticul.
Cum se face
Pentru a face electroforeza este necesar gelul, care poate fi din poliacrilamidă sau agaroză în funcție de obiectiv, tampon și cuva de electroforeză, marker de greutate moleculară și un colorant fluorescent, pe lângă un echipament de lumină UV sau LED, cunoscut și sub denumirea de transilluminator.
După prepararea gelului, trebuie să se plaseze un obiect specific, astfel încât sondele să fie făcute în gel, numit popular pieptene și să se lase gelul să se stabilească. Când gelul este gata, trebuie doar să aplici substanțele pe puțuri. Pentru aceasta, trebuie să se plaseze un marker de greutate moleculară într-una dintre godeuri, un control pozitiv, care este substanța despre care se știe ce este, un control negativ, care garantează validitatea reacției și probele de analizat. Toate probele trebuie amestecate cu un colorant fluorescent, deoarece în acest fel este posibilă vizualizarea benzilor de pe transiluminator.
Gelul cu probele trebuie plasat în cuva de electroforeză, care conține soluția de tampon specifică, apoi dispozitivul este pornit astfel încât să existe curent electric și, în consecință, o diferență de potențial, care este importantă pentru separare particule în funcție de sarcina și dimensiunea lor. Durata de funcționare electroforetică variază în funcție de scopul procedurii și poate dura până la 1 oră.
După timpul determinat, este posibilă vizualizarea rezultatului rulării electroforetice prin transiluminator. Atunci când gelul este plasat sub lumină UV sau LED, este posibil să vizualizeze modelul de bandă: cu cât molecula este mai mare, cu atât migrația sa este mai mică, apropiindu-se de fântână, în timp ce molecula este mai ușoară, cu atât potențialul migrator este mai mare..
Pentru ca reacția să fie validată, benzile controlului pozitiv trebuie vizualizate și controlul negativ nu trebuie vizualizat, deoarece altfel este un indiciu că a existat contaminare și întregul proces trebuie repetat.
Tipuri de electroforeză
Electroforeza poate fi realizată în diferite scopuri și, în funcție de obiectivul său, pot fi utilizate mai multe tipuri de gel, cele mai frecvente fiind poliacrilamida și agaroza.
Electroforeza pentru identificarea microorganismelor este mai frecventă să fie efectuată în laboratoarele de cercetare, cu toate acestea, în scopuri de diagnostic, electroforeza poate fi utilizată pentru a identifica bolile și bolile hematologice care evoluează odată cu creșterea cantității de proteine, fiind principalele tipuri de electroforeză.:
1. Electroforeza hemoglobinei
Electroforeza hemoglobinei este o tehnică de laborator efectuată pentru identificarea diferitelor tipuri de hemoglobină care circulă în sânge, ceea ce face posibilă identificarea prezenței bolilor legate de sinteza hemoglobinei. Tipul de hemoglobină este identificat prin electroforeză la un pH specific, ideal între 8, 0 și 9, 0, fiind verificat un model de benzi care poate fi comparat cu modelul normal, permițând identificarea prezenței hemoglobinelor anormale.
Pentru ce se face: electroforeza hemoglobinei este realizată pentru investigarea și diagnosticarea bolilor legate de sinteza hemoglobinei, cum ar fi anemia cu celule secera și boala hemoglobinei C, pe lângă faptul că este utilă în diferențierea talasemiei. Aflați cum puteți interpreta electroforeza hemoglobinei.
2. Electroforeza proteinelor
Electroforeza proteică este un examen solicitat de medic pentru a evalua cantitatea de proteine care circulă în sânge și, astfel, pentru a identifica bolile. Acest test se face dintr-o probă de sânge, care este centrifugată pentru a obține plasma, partea de sânge constituită, printre alte substanțe, de proteine.
După electroforeză, un model de benzi poate fi vizualizat și, ulterior, un grafic în care este indicată cantitatea fiecărei fracții de proteine, fiind fundamentală pentru diagnostic.
Pentru ce se face: Electroforeza proteică permite medicului să investigheze apariția mielomului multiplu, deshidratării, cirozei, inflamației, bolilor hepatice, pancreatitei, lupusului și hipertensiunii arteriale, în conformitate cu modelul de bandă și graficul prezentat în raportul de examinare.
Înțelegeți cum se face și cum să înțelegeți rezultatul electroforezei proteice.
